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血清质检方法和重要作用

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细胞培养基的构成中动物血清对细胞的生长繁殖起着重要作用。在动物血清中牛血清的应用又是zui广泛的,所以想要细胞在培养过程中长的好、稳定,牛血清的质量好坏直接影响生物研究的质量和安全性,使用质量好的牛血清也是细胞培养中的重要环节。

       血清是提供生长激素、营养物,以及低分子营养物;提供结合蛋白;能结合或调变它们所结合的物质活力;是细胞贴壁、铺展生长所需因子的来源;起酸碱度缓冲液作用;提供蛋白酶抑制剂;细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受损伤;能与有毒金属和热源物质结合,起到解毒作用。

 

 

      血清分类
      胎牛血清:八月龄胎牛心脏穿刺取血
      新生牛血清:出生12-24小时新生牛静脉采血
      小牛血清:出生三月龄小牛动脉采血分离血清
      血清来源
      来自国内非疫区,有说明血清来源的证明资料:包括收集过程的全部资料、检验结果和交付情况。
      血清收集
      胎牛血清是心脏穿刺取血,新生牛(10~14天)和小牛(10个月内)血清静脉取血。血清在低温下采集、一次分离、分离后立即混合冻存,符合工业生产的标准。
      血清制备
      1、热灭活血清(非必须)
      2、γ-射线照射:γ-射线照射可以有效灭活血清中可能污染的病毒、支原体。
      3、除菌过滤:胎牛血清要通过三层100nm过滤。
      血清质检方法
      ⑴、化学检测
      A 生化检测:胆固醇、甘油三酯、胆红素 、尿素、尿酸、葡萄糖、谷丙转氨酶、高筒、体  酮、雌二醇等检测
      B 微量元素检测:钾、钠,铁、氯化物、钙、镁、总铁结合力、血清唾液酸等检测
      C 蛋白检测:白蛋白和球蛋白检测
      ⑵、微生物检查
      ①、细菌和真菌:直接培养法
      ②、支原体检测:培养法,DNA荧光染色
      ③、病毒检测:直接荧光抗体检测
      牛兰舌病毒 Bovin blue tongue;
      牛腺病毒 Bovine Adenovirus;
      牛细小病毒 Bovine Parvovirus;
      牛病毒性腹泄病毒 Bovine Viral Diarhea Virus;
      狂犬病病毒 Rabies;
      呼肠弧病毒 Reovirus;
      牛呼吸道合胞病毒 BRSV;

      副流感病毒Ⅲ型 Parainfluenza。

      工欲善其事必先利其器,所以选择好的血清也相当的重要,为了更好的培养细胞,一定要选择正规质量好的血清,不要随便使用便宜的,导致zui后的科研成果不理想。

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