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人乳腺癌细胞MDA-MB-231的传代步骤是怎样的?

更新时间:2023-06-25 浏览次数:3188

  人乳腺癌细胞MDA-MB-231是一种人乳腺癌细胞系,常用于肿瘤转移和侵袭性的研究。该细胞系来源于一个四级侵袭性乳腺癌患者的异种移植物,在体内形成了高度转移和恶性侵袭的表现。
 
  通常在无菌环境中使用层流罩。培养基的更换与细胞的生长速度密切相关。如果在6-16小时内更换培养基,可以去除残留的亚甲基枫树和死细胞。可用于进一步科学研究,不能用于治疗等方面。
  血清的类型和质量会对人乳腺癌细胞MDA-MB-231的生长产生影响。血清是细胞培养非常重要的营养来源。错误使用血清会使细胞无法存活。细胞无法存活的另一个原因是培养基。每个细胞系都有其特定的用途和适应的细胞培养基。如果突然使用不同培养条件的培养基,大多数细胞不能立即适应。
 
  1、用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲,然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代,一般2到3天换一次液;
  2、待细胞长满瓶底面积80%-90%,需要对其进行传代,传代比例为1:3到1:6;
  3、人乳腺癌细胞MDA-MB-231传代步骤:将0.25%胰酶-0.53mMEDTA消化液置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入3-5mlPBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间,记录最佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入3ml培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之*脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清,加入*培养基重悬细胞,进行传代。
 
  MDA-MB-231细胞具有以下特征:
  高度转移能力:该细胞系可以从原位肿瘤进入血液或淋巴管道,并在机体其他部位进行远处转移;
  低黏附性:这类肿瘤细胞容易在无血清培养条件下暴发式扩张,并不容易贴壁死亡;
  快速增殖:MDA-MB-231生长快、分裂率高,呈纤锥型或多角形;
  药物耐受性强:经过多次化学治疗后,部分患者可能出现药物耐受情况。
  缺少ERα雌激素受体表达,即是TNBC(三阴)(Triple-negative breast cancer)之一。

人乳腺癌细胞MDA-MB-231

 

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