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STR鉴定的操作流程主要包括细胞提取、PCR扩增、电泳分离、数据分析和结果比对。
细胞提取:从待验证的细胞样本中提取DNA。这通常通过使用特定的提取方法,如酚/氯仿法或商业化的DNA提取试剂盒来完成。
PCR扩增:提取的DNA进行PCR(聚合酶链式反应)扩增,以增加待测STR位点的数量,从而提高检测敏感性。在PCR反应中,使用具有特异性的引物来扩增选择的STR位点。
电泳分离:PCR反应产物与分析媒介(如聚丙烯酰胺凝胶)混合后,通过电泳技术进行分离。电泳时,DNA片段按照大小被分离成不同的条带,从而形成电泳图谱。
数据分析:将电泳分离得到的STR位点图谱进行检测和解读。这通常通过使用自动DNA分析设备,通过软件分析电泳图谱,测定每个STR位点处相应的等位基因数量来完成。
结果比对:将待验证细胞的STR位点与已知样本(如参考样本或数据库中的数据)进行比对分析。通过比对,确定待验证细胞样本与参考样本的相似性,以得出验证结果。
注意事项包括:
在进行STR测定时,要遵循操作规范,确保实验结果的准确性。
选择合适的样品进行测定,确保样品具有代表性。
在使用STR测定仪器之前,进行仪器的校准,以保证测量结果的准确性。
及时记录实验数据,避免遗漏或错误。
保持实验环境的稳定,避免外部因素对实验结果的影响。
此外,还需要注意样品寄送的方式和时间,以及结果的交付方式。样品应通过加干冰或冰袋的方式寄送,并保证细胞数量足够。常规检测时间通常为2~3周,超常检测时间则在10个工作日之内。
总的来说,STR鉴定是一项复杂且需要高度专业性的技术,建议在专业实验室或专业人员的指导下进行。