小鼠肾腺癌细胞的培养方法及注意事项

　　小鼠肾腺癌细胞的培养方法及注意事项概述如下：

　　在培养小鼠肾腺癌细胞时，首先需要准备适当的培养基，通常使用的是DMEM（高糖）培养基，并添加10%的胎牛血清（FBS）以及必要的抗生素，如青霉素和链霉素（P/S），以防止细菌污染。细胞应在含有95%空气和5%二氧化碳的培养箱中，于37℃恒温条件下进行培养。

　　收到细胞后，应首先检查细胞培养瓶是否破损，培养液是否有漏出或浑浊现象。确认无误后，用75%的酒精对培养瓶表面进行消毒，然后将培养瓶放入培养箱中静置24小时，使细胞状态稳定。在显微镜下观察细胞生长状态，当细胞密度达到80%90%时，即可进行传代培养。

　　传代时，应先弃去旧的培养基，用不含钙、镁离子的PBS溶液润洗细胞12次。然后加入适量的胰酶消化液，置于培养箱中消化12分钟，待细胞大部分变圆并脱落后，加入含血清的培养基终止消化。将细胞悬液离心后，弃去上清液，用新的培养基重悬细胞，并按适当的比例分到新的培养瓶中继续培养。

　　在培养过程中，需要注意定期更换培养基，通常建议每周更换2~3次。同时，应定期观察细胞生长状态，记录细胞形态、密度等信息。当细胞生长至一定数量时，可考虑进行冻存，以便后续实验使用。

　　总之，小鼠肾腺癌细胞的培养需要严格的无菌操作、适当的培养条件和定期的观察记录，以确保细胞的健康生长和实验的顺利进行。