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STR(ShortTandemRepeat,短串联重复序列)鉴定技术是一种基于DNA分子多态性的遗传分析方法,通过检测特定基因座上短串联重复序列的重复次数差异,实现个体或细胞系的精准识别。其核心原理在于:STR序列由2-6个碱基组成的核心单元串联重复,不同个体或细胞系在同一基因座的重复次数存在差异,形成独特的“遗传指纹”。技术流程包括DNA提取、PCR扩增特定STR位点、电泳分离扩增产物,最终通过条带位置确定重复次数,生成分型数据。
在人肝癌细胞研究中,STR鉴定技术具有双重价值:
细胞系身份验证:肝癌细胞系(如MHCC97-H、HCCLM3)在传代过程中易发生交叉污染或标记错误。通过检测21个人类STR位点(如TH01、D5S818等),可与ATCC等数据库比对,确认细胞系来源及纯度。例如,HCCLM3细胞系经STR鉴定后,可排除HeLa等常见污染细胞,确保实验材料准确性。
遗传稳定性监测:肝癌细胞系在长期培养中可能发生遗传漂变。定期STR检测可追踪特定基因座重复次数变化,判断细胞是否保持原始遗传特征。例如,MHCC97-H细胞系通过STR分型确认其高转移性亚群(SP细胞)的遗传稳定性,为肝癌转移机制研究提供可靠模型。
此外,STR技术还应用于肝癌细胞治疗产品的质量控制。在CAR-T细胞治疗中,通过STR鉴定可验证供体细胞与治疗产品的遗传一致性,避免免疫排斥风险。其高灵敏度(联合16个位点识别率达99.9999999998%)与标准化流程,使其成为肝癌基础研究、药物筛选及细胞治疗领域的工具。