人肝内胆管癌细胞STR鉴定标准操作流程与结果解读指南

　　一、标准操作流程

　　样本准备：从人肝内胆管癌细胞系中提取基因组DNA，确保样本具有代表性且细胞数量充足。DNA提取可使用商用试剂盒或传统有机溶剂法，提取后需检测DNA浓度和纯度，以满足后续检测要求。

　　STR位点扩增：选取人类基因组中高度多态性的13-24个STR位点，如TH01、TPOX、vWA等，使用特异性引物和PCR技术扩增这些位点。引物通常标记荧光，便于后续检测。

　　电泳分离与检测：将PCR扩增产物进行毛细管电泳分离，利用荧光检测系统（如ABI3500遗传分析仪）检测电泳分离后的STR片段长度，生成电泳图谱。

　　数据分析：根据电泳图谱分析各STR位点的等位基因（片段长度），生成细胞系的STR基因型。将获得的STR基因型与已知细胞系的STR数据库（如ATCC、DSMZ等）进行比对，确认细胞系身份或检测是否存在交叉污染。

　　二、结果解读指南

　　匹配度判定：若受检细胞STR位点的基因分型数据与其对应的标准细胞系匹配度≥80%，则判定为标准细胞系或其衍生细胞系；若匹配度在56%-80%之间，需结合细胞系形态、特异性标记物等辅助分析进行综合判断；若匹配度≤56%，则判定与其对应的标准细胞系不相关。

　　多等位基因分析：人源细胞STR图谱上，一个基因位点通常只出现1个或2个峰（纯合或杂合）。若出现3个及以上峰，可能提示存在同源物种交叉污染或三倍体等多倍体突变现象。

　　交叉污染检测：通过比对多个细胞样本的STR基因型，可检测是否存在细胞系间的交叉污染。若检测到混合样本中的不同STR基因型，则确认存在多种细胞来源。