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小鼠小胶质BV2原代培养的主要试剂是什么?

时间:2020-11-24 浏览次数:299

  组成中枢神经系统的细胞主要是神经胶质细胞,包括大胶质细胞(星形胶质细胞和少突胶质细胞)和小鼠小胶质BV2。小胶质细胞是中枢神经系统的主要免疫细胞,可呈递抗原,分泌多种细胞因子,吞噬细胞病原体和坏死组织。它们被认为是大脑中的单核巨噬细胞,由于小胶质细胞在颅内免疫反应中的重要作用,小胶质细胞的研究已成为一个热点。
  小鼠小胶质BV2的体外培养是研究小胶质细胞功能的重要途径。在这里,我们将整理小鼠小胶质细胞的原代培养。那么主要试剂是什么?
 

小鼠小胶质BV2

  1、PBS:PBS粉末,向每个袋中加入ddH2O,使体积达到1000ml,将pH值调节至7.2,高压灭菌并灭菌。
  2、0.25%胰蛋白酶消化液:使用时浓度为0.25%,含有0.02%EDTA。准备时,将250mg胰蛋白酶和20mgEDTA溶解在100mLPBS溶液中,并在无菌手术台上使用0.22um一次性溶液,通过过滤器过滤,取50ml等分试样,并保存在4°C下。
  3、接种物的制备:先用DMEM-F12进行90%基础培养,然后再用10%胎牛血清,后用1%体积分数的双抗体原液(青霉素+链霉素)制成青霉素和链霉素元素分别为100U/mL和100U/mL,分别储存在4℃的冰箱中。
  4、抗生素:将青霉素(800,000U)和链霉素(1,000,000U)溶解在无菌手术台中高压灭菌的双蒸馏水中。分别加入4ml无菌水/青霉素和5ml无菌水/链霉素,分别制成200,000u/ml等分试样,在-20°C的冰箱中储存,并在使用前在4°C融化。注意避免反复冷冻和解冻,并使培养基的终浓度为100u/ml。
  5、0.01%L-聚赖氨酸溶液的制备:称取10mgL-聚赖氨酸溶液,将其溶于100ml无菌去离子水中,过滤并用0.22μm正压过滤器分装,在-20℃下储存。
  6、0.4%锥虫蓝溶液的制备。

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