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人胚肾细胞293T细胞培养有哪些优点?

时间:2021-07-21 浏览次数:163

  人胚肾细胞293T细胞培养的优点如下:
  1、研究对象为活细胞
  在实验中,可以根据需要保持细胞活力,并且可以长期监测、检测甚至定量评估一些活细胞的状况,包括活细胞的形状、结构和生命活动。
  2、研究条件可以人为控制
  pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学条件可根据实际需要人为控制。同时,可以应用化学、物理和生物因素作为实验观察的条件。这些因素也可以受到严格控制。
  3、研究样本能达到比较均一
  经过一定代数的细胞培养,得到的细胞系可以达到均一,属于同一类型的细胞。如有必要,可采用克隆等方法对细胞进行纯化。
  4、研究内容易于观察、检测和记录
  使用了各种研究技术,如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共聚焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等仪器设备。
  人胚肾细胞293T培养操作流程:
  1、培养基的制备及培养冻存条件:
  1)准备RPMI-1640培养基(rpmi-1640:gibco,货号21875-091),90%;优质胎牛血清为10%。
  2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37℃,培养箱湿度70%~80%。
  3)冷冻保存液:90%血清,10%DMSO,现用现用,液氮保存。
  2、细胞处理:
  1)复苏细胞:将含有1ml细胞悬液的冻存管放入37℃水浴中(水面应低于冻存管盖),摇匀解冻,转移至15ml离心管中,加入4ml培养基提前准备好,搅拌均匀。1000rpm离心4分钟,弃上清,加入1ml培养基并吹匀。然后将所有细胞悬液转移到含有5ml培养基的培养瓶中过夜培养。第二天,更换液体并检查细胞密度。
  2)人胚肾细胞293T细胞培养:细胞密度达到80%-90%即可培养。
 

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