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小鼠小胶质BV2使用小tips来了,请注意查收

时间:2021-12-23 浏览次数:41

  小鼠小胶质BV2是从小鼠脑小胶质瘤中收集的,干冰运输并转移到液氮或-80度冰箱冷冻或收到后立即直接回收;存活的细胞在接收后应继续生长,当传代达到良好的细胞生长状态时再进行冷冻。收到后,请检查是否有漏液。先在显微镜下确认细胞生长状态,用酒精对瓶壁进行消毒,将T25瓶在37℃培养2-3H左右。离心后,除去上清液,加入6ml新的完全培养基,重新加入原T25培养瓶。如果细胞长到90%,请及时进行细胞传代,传代应使用完整培养基。半贴壁细胞会黏附在瓶底,但黏附不紧密。轻轻吸取培养基,轻轻吹打细胞表面,细胞表面不经胰蛋白酶消化即脱落。推荐使用培养皿进行培养,更适合吹细胞。吹细胞时尽量轻柔,不要产生过多气泡,以免影响细胞状态。下面是小鼠小胶质BV2使用小tips,希望对你的使用会有所帮助。

 

小鼠小胶质BV2
 

 

  1、小鼠小胶质BV2呈半贴壁圆形或多角形,有的呈圆形悬浮状。它们可以在传代过程中收集和培养。更换溶液时,将悬浮的细胞离心收集,然后重新连接到原瓶中。如果贴壁细胞多,活性好,可以不用悬浮细胞;
  2、细胞对胰蛋白酶敏感。胰蛋白酶消化后,细胞形状会更加纺锤形并变得紧密,不建议通过胰蛋白酶消化;
  3、细胞生长快,培养基消耗快。在培养过程中密切注意细胞状态。当密度高,培养液趋于变黄时,及时更换溶液,避免细胞状态变差;
  4、小鼠小胶质BV2细胞冷冻后,取出上清,用PBS洗涤,然后加入1ml胰蛋白酶。待细胞变圆脱落后,加入1ml完全培养基终止消化,用血细胞计数板计数;
  5、4min1000rpm离心去除上清液。加入1ml血清重悬细胞,根据细胞数加入血清和DMSO,轻轻混匀。DMSO终浓度为10%,细胞密度为1-2xe6/ml。每个冷冻保存管用1ml细胞悬液冷冻,注意冻存管的鉴别;
  6、将冻存管放入程序冷却箱内,放入-80℃冰箱,至少2小时后转入液氮冲洗保存。记录低温恒温器的位置以备下次检索。

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