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人胚肾细胞293T接收后要做这些处理

更新时间:2023-06-16 浏览次数:1046

  人胚肾细胞293T是一种广泛使用的细胞系,也被称为HEK 293T或293 cells。它最初由Frank Graham和Alex van der Eb于1977年在荷兰莱顿大学建立。
  这种细胞起源于人类的胚胎肾小管上皮细胞,因此能够表达许多与肾功能相关的基因和蛋白质。293T细胞株可以通过无血清培养、悬浮培养以及有限制性酶消化等方法进行传代。
 
  一、人胚肾细胞293T接收后要做这些处理:
  1、收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
  2、在显微镜下确认人胚肾细胞293T生长状态时,在低倍镜(4或5X物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下,同时给刚收到的细胞拍照,(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。
  3、观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h。
  4、贴壁细胞:在运输过程中贴壁细胞会有脱落的现象,如发现贴壁细胞有脱落或者脱落后抱团生长,可将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和未贴壁细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到加有按照说明书细胞培养条件新配制的培养基的原培养瓶中(或新的培养瓶中)。
  5、悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的培养基)。
  6、备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养人胚肾细胞293T,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的培养基来培养细胞。收到细胞后一次传代建议1:2传代。
 
  二、具有以下特点:
  1、高转染效率:由于其双倍体状态,在转染时比单倍体细 胞更容易接受外源DNA并表达。
  2、容易获取且稳定:相较其他已知能够支持多次分裂生长癌变标准株(如HeLa),293T不能连续无限度地 进行传代,所以不存在恶性增殖的风险 ,但其仍然保持了高 度稳定性。
  3、可应用于研究不同类型病毒感染机理:由于其广泛应用 于原代细 胞 文化中作为对照组,而新出现的病毒往往没有可靠 的细胞系可以进行繁殖,因此293T被用于在人类细 胞中表达和复 制不同类型的病毒。
  4、适合制备慢病毒载体:由于其能够高效地产生包含重组基 因的慢 病 毒,所以被广泛应用于基因传递工具之一。

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