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产品名称:

大鼠心肌细胞

产品型号: H9C2
产品时间: 2023-06-06
描述:大鼠心肌细胞H9C2/镜像绮点(iCell)介绍
B. Kimes and B. Brandt从源于BD1X大鼠胚胎心脏组织的克隆细胞株亚克隆了H9c2(2-1)细胞株,它表现许多骨骼肌的特性。这个细胞株中的成肌细胞能融合形成多核的肌管,并对乙酰胆碱的刺激发生反应。如果培养基中的血清浓度下降到1%。

产品介绍

   大鼠心肌细胞H9C2/镜像绮点(iCell)介绍
  B.KimesandB.Brandt从源于BD1X大鼠胚胎心脏组织的克隆细胞株亚克隆了H9c2(2-1)细胞株,它表现许多骨骼肌的特性。这个细胞株中的成肌细胞能融合形成多核的肌管,并对乙酰胆碱的刺激发生反应。如果培养基中的血清浓度下降到1%,融合发生得很快。
 
  细胞特性
  (1)来源:心脏
  (2)形态:成肌细胞,贴壁生长
  (3)含量:>1x106个/mL
  (4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
  (5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
 
  大鼠心肌细胞H9C2/镜像绮点(iCell)运输和保存:
  可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:
  (1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;
  (2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
  (3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。
  细胞用途:仅供科研使用。
 
  H9C2大鼠心肌细胞/镜像绮点(iCell)接受后的处理:
  (1)收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。
  (2)请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
  (3)弃去T25瓶中的培养基,添加6ml新的*培养基。
  (4)如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代。
  (5)接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。
 
  细胞培养步骤
  一.培养基及培养冻存条件准备:
  (1)准备DMEM培养基;北美胎牛血清,10%;双抗1%。
  (2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
  (3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
 
  二.细胞处理:
  (1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
  (2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
 
  对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
  1、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
  2、加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
  3、按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
  4、收到细胞后*传代推荐将细胞悬液按1:2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中,建议冻存一支备用,后续传代根据实际情况按1:2到1:5的比例进行。
  细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。
 
  下面T25瓶为例;
  1、细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml*培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
  2、1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
  3、将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
 
  镜像绮点(上海)细胞技术有限公司主要产品和服务介绍:
  一、原代细胞服务:
  (1)各类模式哺乳动物的多种原代细胞资源
  (2)多种人源性正常及肿瘤原代细胞资源
  (3)原代细胞分离和培养相关试剂、kit、培养基添加剂等
  (4)原代细胞相关技术服务及整体实验外包服务
  二、细胞系服务:
  (1)细胞株/系培养、增殖、冻存和相关说明书
  (2)细胞系培养过程的技术指导
  (3)细胞系培养基、添加剂、血清及相关生长因子、试剂等
  三、iPS细胞服务:
  (1)iPS细胞基础培养(有滋养层or无滋养层)
  (2)iPS细胞增殖及冷冻保存
  (3)iPS基础培养技术实习
  (4)新药及实验仪器上市前评估
  四、其他技术外包服务、客户定制服务等
 

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