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产品中心产品介绍
一、人单核细胞白血病细胞THP-1/STR鉴定介绍
该细胞对乳汁珠和激活的红细胞有吞噬作用，无表面和胞质免疫球蛋白。可以用佛波醇TPA诱导单核细胞分化。
二、细胞特性
1、来源：急性单核细胞白血病，单核细胞
2、形态：单核细胞，悬浮
3、含量：>1x106个/mL
4、污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5、规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
三、人单核细胞白血病细胞THP-1/STR鉴定运输和保存
可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：
1、干冰运输，收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏；
2、存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
3、收到细胞后请拍照，3天内如果发现污染，请及时拍照与我们联系。
细胞用途：仅供科研使用。
四、细胞接收后的处理：
1、收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2、请先在显微镜下确认细胞生长状态，酒精消毒瓶壁并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3、贴壁细胞：将T25瓶中的细胞培养基离心后，去上清，添加6ml*培养基，加入新的T25瓶中继续培养。悬浮细胞：2-3小时
4、如果细胞长满80%请及时进行细胞传代.
五、细胞培养步骤
一、培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基；胎牛血清，10%；0.05mMβ－巯基乙醇(invitrogen21985)0.05mM；双抗，1%。
2、培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：*培养液95%，DMSO5%（使用该冻存液后，按照我库的经验复苏存活率约50%，复苏后需要额外培养7-10天才能恢复生长）
4、a)该细胞为悬浮细胞，根据培养经验以及客户的反馈，传代时使用【半换液法】对细胞状态较为有利，因此我库建议您使用【半换液法】进行传代。同时，您在收到细胞后，请不要通过离心的方式收集细胞，可以直接向培养瓶中添加等体积的新鲜培养液，然后将细胞吹打均匀后移入两个新的T25培养瓶中继续培养即可。
b)细胞对血清质量较为敏感，我库建议您使用进口*优质血清进行培养。
c)该细胞的培养液中需添加β-巯基乙醇（细胞培养级别，可参考细胞说明书中的品牌、货号），若不添加，可能会对细胞状态造成影响。
d)该细胞对细胞密度较为敏感，培养、传代时请注意保持细胞密度在合适的范围（具体请参考细胞说明书）。
e)该细胞冻存后复苏率较低，冻存时请酌情提高细胞量
六、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、参考传代周期：传代时控制细胞密度在20万-40万活细胞/mL，并在细胞生长至80万-100万cell/mL时进行传代
3、参考传代比例：传代时控制细胞密度在20万-40万活细胞/mL，并在细胞生长至80万-100万cell/mL时进行传代。
4、参考换液频率：传代时换液
七、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。
下面T25瓶为例；
1、细胞冻存时，取上清，可使用血球计数板计数。
2、4min，1000rpm离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为5%，该细胞冻存后复苏率较低，冻存时请酌情提高细胞量.每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识。
3、将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少4个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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