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产品名称:

人单核细胞白血病细胞

产品型号: THP-1
产品时间: 2022-07-18
描述:人单核细胞白血病细胞THP-1对乳汁珠和激活的红细胞有吞噬作用,无表面和胞质免疫球蛋白。可以用佛波醇 TPA诱导单核细胞分化。

产品介绍

   人单核细胞白血病细胞THP-1/STR鉴定介绍
  该细胞对乳汁珠和激活的红细胞有吞噬作用,无表面和胞质免疫球蛋白。可以用佛波醇TPA诱导单核细胞分化。
  细胞特性
  1、来源:急性单核细胞白血病,单核细胞
  2、形态:单核细胞,悬浮
  3、含量:>1x106个/mL
  4、污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
  5、规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
 
  人单核细胞白血病细胞THP-1/STR鉴定运输和保存
  可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:
  1、干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;
  2、存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
  3、收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。
  THP-1人单核细胞白血病细胞/STR鉴定/赛百慷(iCell)
  细胞用途:仅供科研使用。
 
  细胞接收后的处理:
  1、收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。
  2、请先在显微镜下确认细胞生长状态,酒精消毒瓶壁并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
  3)、贴壁细胞:将T25瓶中的细胞培养基离心后,去上清,添加6ml*培养基,加入新的T25瓶中继续培养。悬浮细胞:2-3小时
  4、如果细胞长满80%请及时进行细胞传代.
 
  细胞培养步骤
  一、培养基及培养冻存条件准备:
  1、准备RPMI-1640培养基;胎牛血清,10%;0.05mMβ-巯基乙醇(invitrogen21985)0.05mM;双抗,1%。
  2、培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
  3、冻存液:*培养液95%,DMSO5%(使用该冻存液后,按照我库的经验复苏存活率约50%,复苏后需要额外培养7-10天才能恢复生长)
  4、a)该细胞为悬浮细胞,根据培养经验以及客户的反馈,传代时使用【半换液法】对细胞状态较为有利,因此我库建议您使用【半换液法】进行传代。同时,您在收到细胞后,请不要通过离心的方式收集细胞,可以直接向培养瓶中添加等体积的新鲜培养液,然后将细胞吹打均匀后移入两个新的T25培养瓶中继续培养即可。
  b)细胞对血清质量较为敏感,我库建议您使用进口*优质血清进行培养。
  c)该细胞的培养液中需添加β-巯基乙醇(细胞培养级别,可参考细胞说明书中的品牌、货号),若不添加,可能会对细胞状态造成影响。
  d)该细胞对细胞密度较为敏感,培养、传代时请注意保持细胞密度在合适的范围(具体请参考细胞说明书)。
  e)该细胞冻存后复苏率较低,冻存时请酌情提高细胞量
 
  二、细胞处理:
  1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
  2、参考传代周期:传代时控制细胞密度在20万-40万活细胞/mL,并在细胞生长至80万-100万cell/mL时进行传代
  3、参考传代比例:传代时控制细胞密度在20万-40万活细胞/mL,并在细胞生长至80万-100万cell/mL时进行传代。
  4、参考换液频率:传代时换液
 
  对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
  方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
  方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
  3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。
 
  下面T25瓶为例;
  1、细胞冻存时,取上清,可使用血球计数板计数。
  2、4min,1000rpm离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为5%,该细胞冻存后复苏率较低,冻存时请酌情提高细胞量.每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。
  3、将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少4个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
 

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