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产品名称:

人单核细胞白血病细胞

产品型号: THP-1
产品时间: 2020-07-07
描述:人单核细胞白血病细胞THP-1/STR鉴定介绍$n该细胞对乳汁珠和激活的红细胞有吞噬作用,无表面和胞质免疫球蛋白。可以用佛波醇 TPA诱导单核细胞分化$n细胞特性$n1) 来源:急性单核细胞白血病,单核细胞$n2) 形态:单核细胞,悬浮$n3) 含量:>1x106 个/mL$n4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性$n5) 规格:T25瓶或

产品介绍

人单核细胞白血病细胞THP-1/STR鉴定介绍

该细胞对乳汁珠和激活的红细胞有吞噬作用,无表面和胞质免疫球蛋白。可以用佛波醇 TPA诱导单核细胞分化。
 
细胞特性
1) 来源:急性单核细胞白血病,单核细胞
2) 形态:单核细胞,悬浮
3) 含量:>1x106 个/mL
4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

人单核细胞白血病细胞THP-1/STR鉴定运输和保存

可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:

(1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;

(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

(3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。

 THP-1 人单核细胞白血病细胞/STR鉴定/赛百慷(iCell)

细胞用途:仅供科研使用。

细胞接收后的处理:
1) 收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。
2) 请先在显微镜下确认细胞生长状态,酒精消毒瓶壁并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 贴壁细胞:将T25瓶中的细胞培养基离心后,去上清,添加6ml完全培养基,加入新的T25瓶中继续培养。
      悬浮细胞:2-3小时
4) 如果细胞长满80%请及时进行细胞传代.
 
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备RPMI-1640培养基;胎牛血清,10%;0.05 mM β-巯基乙醇(invitrogen 21985) 0.05mM;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:完全培养液95%,DMSO 5%(使用该冻存液后,按照我库的经验复苏存活率约50%,复苏后需要额外培养7-10天才能恢复生长)
 
4) a) 该细胞为悬浮细胞,根据培养经验以及客户的反馈,传代时使用【半换液法】对细胞状态较为有利,因此我库建议您使用【半换液法】进行传代。同时,您在收到细胞后,请不要通过离心的方式收集细胞,可以直接向培养瓶中添加等体积的新鲜培养液,然后将细胞吹打均匀后移入两个新的T25培养瓶中继续培养即可。
b) 细胞对血清质量较为敏感,我库建议您使用进口大品牌优质血清进行培养。
c) 该细胞的培养液中需添加β-巯基乙醇(细胞培养级别,可参考细胞说明书中的品牌、货号),若不添加,可能会对细胞状态造成影响。
d) 该细胞对细胞密度较为敏感,培养、传代时请注意保持细胞密度在合适的范围(具体请参考细胞说明书)。
e) 该细胞冻存后复苏率较低,冻存时请酌情提高细胞量
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 参考传代周期:传代时控制细胞密度在20万-40万活细胞 / mL,并在细胞生长至80万-100万 cell / mL时进行传代
3) 参考传代比例:传代时控制细胞密度在20万-40万活细胞 / mL,并在细胞生长至80万-100万 cell / mL时进行传代。
4) 参考换液频率:传代时换液
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。

下面T25瓶为例;  

1,细胞冻存时,取上清,可使用血球计数板计数。
2,4min ,1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为5%,该细胞冻存后复苏率较低,冻存时请酌情提高细胞量.每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。
3,将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少4个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

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        一、原代细胞服务:
               各类模式哺乳动物的多种原代细胞资源
               多种人源性正常及肿瘤原代细胞资源
               原代细胞分离和培养相关试剂、kit、培养基添加剂等
               原代细胞相关技术服务及整体实验外包服务

        二、细胞系服务:
               细胞株/系培养、增殖、冻存和相关说明书
               细胞系培养过程的技术指导
               细胞系培养基、添加剂、血清及相关生长因子、试剂等

        三、iPS细胞服务:
               iPS细胞基础培养(有滋养层or无滋养层)
               iPS细胞增殖及冷冻保存
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