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UMNSAH/DF-1 鸡胚胎成纤维细胞/赛百慷

产品型号: UMNSAH/DF-1
产品时间: 2020-04-23
描述:UMNSAH/DF-1 鸡胚胎成纤维细胞/赛百慷
UMNSAH/DF-1 鸡胚胎成纤维细胞介绍
该细胞是起源于10日龄的ELL-0鸡蛋的鸡细胞株,自发永生化。分离原代鸡胚成纤维细胞并在培养液中培养;传代直到衰老;在衰老过程中离心以保持细胞培养在30%到60%满;该细胞可作为病毒增殖、重组蛋白表达和重组病毒生产的基质

产品介绍

UMNSAH/DF-1 鸡胚胎成纤维细胞/赛百慷(iCell)介绍

该细胞是起源于10日龄的ELL-0鸡蛋的鸡细胞株,自发永生化。分离原代鸡胚成纤维细胞并在培养液中培养;传代直到衰老;在衰老过程中离心以保持细胞培养在30%到60%满;不衰老的克隆进行鉴定并传代不少于30次。在软琼脂上没有观察到克隆增殖,说明这些细胞是永生化而没有转化。该细胞可作为病毒增殖、重组蛋白表达和重组病毒生产的基质。

 

细胞特性

1) 来源:鸡胚

2) 形态:成纤维细胞,贴壁生长

3) 含量:>1x106 个/mL

4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

 

运输和保存

可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:

(1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;

(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

(3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。

 

细胞用途:仅供科研使用。

 

UMNSAH/DF-1 鸡胚胎成纤维细胞/赛百慷(iCell)接收后的处理:

1) 收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。

2) 请先在显微镜下确认细胞生长状态,酒精消毒瓶壁并将T25瓶置于39℃培养约2-3h。

3) 弃去T25瓶中的培养基,添加6ml新的完全培养基。

4) 如果细胞长满90%请及时进行细胞传代。

5) 接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。

 

细胞培养操作规程,供参考

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备DMEM培养基;优质胎牛血清,10%;双抗 1%

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:39℃,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1,复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。

2,细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于39℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。

3. 轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1:2到1:5比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。

注:*次传代推荐传代比例为1:2,以后传代比例可根据客户需要自己决定。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。

下面T25瓶为类;

1,细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

2,4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度1-2xE6/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。

3,将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

备注:细胞冻存后复苏存活率只有50%左右,建议加大冻存密度。

赛百慷(上海)生物技术股份有限公司主要产品和服务介绍:

        一、原代细胞服务:
               各类模式哺乳动物的多种原代细胞资源
               多种人源性正常及肿瘤原代细胞资源
               原代细胞分离和培养相关试剂、kit、培养基添加剂等
               原代细胞相关技术服务及整体实验外包服务

        二、细胞系服务:
               细胞株/系培养、增殖、冻存和相关说明书
               细胞系培养过程的技术指导
               细胞系培养基、添加剂、血清及相关生长因子、试剂等

        三、iPS细胞服务:
               iPS细胞基础培养(有滋养层or无滋养层)
               iPS细胞增殖及冷冻保存
               iPS基础培养技术实习
               新药及实验仪器上市前评估

        四、其他技术外包服务、客户定制服务等

赛百慷(上海)生物技术股份有限公司

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