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产品介绍
MC38小鼠结肠癌细胞/种属鉴定
一、细胞特性
- 来源：结肠癌
- 形态：上皮细胞样
- 含量：>1x106 个/mL
- 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
- 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
二、运输和保存：
使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后，可在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操作台弃去上清，加入推荐使用的培养基后转移至10cm培养皿或者T75培养瓶中培养，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
三、小鼠结肠癌细胞MC38用途：仅供科研使用。
四、细胞培养步骤
1、培养基及培养冻存条件准备：
- 准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，80%；优质胎牛血清，20%。
- 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
- 冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
2、细胞处理：
- 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
- 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
3、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
- 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
- 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
- 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
- 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
4、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量yi酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
五、镜像绮点（上海）细胞技术有限公司主要产品和服务介绍：
1、原代细胞服务：
- 各类模式哺乳动物的多种原代细胞资源
- 多种人源性正常及肿瘤原代细胞资源
- 原代细胞分离和培养相关试剂、kit、培养基添加剂等
- 原代细胞相关技术服务及整体实验外包服务
2、细胞系服务：
- 细胞株/系培养、增殖、冻存和相关说明书
- 细胞系培养过程的技术指导
- 细胞系培养基、添加剂、血清及相关生长因子、试剂等
3、iPS细胞服务：
- iPS细胞基础培养（有滋养层or无滋养层）
- iPS细胞增殖及冷冻保存
- iPS基础培养技术实习
- 新药及实验仪器上市前评估
4、其他技术外包服务、客户定制服务等
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