服务热线
400-021-2021
产品介绍
1） 来源：小鼠，胚胎内细胞团
2） 形态：球形克隆
3） 含量：>1x106 个/mL
4） 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存
可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式
（1）干冰运输，收到后立即转入液氮冻存或直接复苏；
（2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。
（3）具体操作见细胞培养步骤。收到细胞后请拍照，3天内如果发现污染，请及时拍照与我们联系。
细胞接受后的处理：
1） 收到细胞后，请检查发货培养瓶的状况，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2） 在显微镜下确认细胞生长状态时，在低倍镜（4或5X物镜)下进行，能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下，同时给细胞拍照各2-3张（10×，20×都要拍照），作为售后的依据。
3） 观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h。
4） 贴壁细胞：在运输过程中贴壁细胞会有脱落的现象，如发现贴壁细胞有脱落或者脱落后抱团生长，可将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，然后抽出瓶中的培养基和未贴壁细胞1000rpm离心5分钟，弃去上清重悬后接种到加有按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基的原培养瓶中（或新的培养瓶中）。
5） 悬浮细胞：T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟，弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中（加入按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基）。
6）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。 收到细胞后*次传代建议1：2传代 。
细胞用途：仅供科研使用。
E14 小鼠胚胎干细胞/镜像绮点（iCell）培养操作规程，供参考
一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备DMEM（推荐iCell-0001）培养基；优质胎牛血清，15%；L-Glu，1%；NEAA，1%；丙酮酸钠，1%；添加1uL/mLβ-Mer和0.1uL/mLLIF；双抗，1%；培养瓶用0.1%明胶包被
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二． 细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。
3. 轻轻吹打后吸出，移入15ml离心管中，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养液后吹匀。
4. 收到细胞后*传代推荐将细胞悬液按1：2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中，建议冻存一支备用，后续传代根据实际情况按1:2到1:5的比例进行。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。
下面T25瓶为类；
1，细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入1ml*培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2，4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为10%，细胞密度1-2xE6/ml，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识。
3，将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
镜像绮点（上海）细胞技术有限公司主要产品和服务介绍：
一、原代细胞服务：
各类模式哺乳动物的多种原代细胞资源
多种人源性正常及肿瘤原代细胞资源
原代细胞分离和培养相关试剂、kit、培养基添加剂等
原代细胞相关技术服务及整体实验外包服务
二、细胞系服务：
细胞株/系培养、增殖、冻存和相关说明书
细胞系培养过程的技术指导
细胞系培养基、添加剂、血清及相关生长因子、试剂等
三、iPS细胞服务：
iPS细胞基础培养（有滋养层or无滋养层）
iPS细胞增殖及冷冻保存
iPS基础培养技术实习
新药及实验仪器上市前评估
四、其他技术外包服务、客户定制服务等
镜像绮点（上海）细胞技术有限公司
相关产品