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SNU-182 人肝癌细胞

产品型号: SNU-182
产品时间: 2023-06-05
描述:SNU-182 人肝癌细胞描述
该细胞系来自 24 岁亚洲男性。细胞包含单个细胞核,Southernblot 可检测到乙型肝炎病毒(HBV)DNA,不表达乙肝病毒基因组 RNA,需在 2 级生物安全防护操作。
细胞特性
1) 来源:人 肝癌
2) 形态:上皮细胞样,贴壁生长
3) 含量:>1x106 个/mL
4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

产品介绍

SNU-182 人肝癌细胞描述

该细胞系来自 24 岁亚洲男性。细胞包含单个细胞核,Southernblot 可检测到乙型肝炎病毒(HBV)DNA,不表达乙肝病毒基因组 RNA,需在 2 级生物安全防护操作。

细胞特性

1) 来源:人 肝癌

2) 形态:上皮细胞样,贴壁生长

3) 含量:>1x106 个/mL

4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

运输和保存

可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式

(1)干冰运输,收到后立即转入液氮冻存或直接复苏;

(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

(3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。

细胞用途:仅供科研使用。

SNU-182 人肝癌细胞接收后的处理:

1) 收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。

2) 在显微镜下确认细胞生长状态时,在低倍镜(4或5X物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下,同时给刚收到的细胞拍照,(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。

3) 观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h。

4) 贴壁细胞:在运输过程中贴壁细胞会有脱落的现象,如发现贴壁细胞有脱落或者脱落后抱团生长,可将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和未贴壁细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到加有按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基的原培养瓶中(或新的培养瓶中)。

5) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基)。

6)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。  收到细胞后di一次传代建议1:2传代 。

SNU-182 人肝癌细胞培养步骤

一.培养基及培养冻存条件准备:

1.准备1640(推荐iCell-0002)培养基,优质胎牛血清FBS 10%;GlutaMAX™-I(GIBCO,35050061) 2mM;Sodium Pyruvate(GIBCO 11360070), 1mM。P/S 1%

2. 培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

3. 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

注:di一次传代推荐传代比例为1:2,以后传代比例可根据客户需要自己决定。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。

下面T25瓶为例;

1,细胞冻存时,取上清,可使用血球计数板计数。

2,4min ,1000rpm 离心去掉上清。加基础培养基和血清重悬细胞,再加入DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为8%,细胞密度1-2xE6/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。

3,将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

 

赛百慷(上海)生物技术股份有限公司主要产品和技术服务:

一、原代细胞服务
       各类模式哺乳动物的多种原代细胞资源;
       多种人源性正常及肿瘤原代细胞资源;
       原代细胞分离和培养相关试剂、kit、培养基添加剂等;
       原代细胞相关技术服务和整体实验外包服务;

二、细胞株/系服务
       细胞株/系培养、增殖、冻存和相关说明书;
       细胞系培养过程的技术指导;
       细胞系培养基、添加剂、血清及相关生长因子、试剂等;

三、iPS细胞
       iPS细胞基础培养(有滋养层or无滋养层在);
       iPS细胞增殖及冷冻保存;
       iPS基础培养技术实习;
       新药及实验仪器上市前评估;

四、技术外包服务:各类细胞生物学实验、分子生物学实验、显微镜拍照服务等

五、其他:根据客户需要定制服务等

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