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产品名称:

人肝癌细胞

产品型号: Hep G2
产品时间: 2022-07-18
描述:人肝癌细胞Hep G2来自15岁男性白人的组织。形态为上皮形,模式染色体数为55,在免疫抑制小鼠中不致瘤。

产品介绍

  人肝癌细胞HEPG2/STR鉴定介绍
  该细胞系来自15岁男性白人的组织。形态为上皮形,模式染色体数为55,在免疫抑制小鼠中不致瘤。
  人肝癌细胞HEPG2/STR鉴定特性
  1、来源:肝细胞癌
  2、形态:上皮细胞样,贴壁生长
  3、含量:>1x106个/mL
  4、污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
  5、规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
 
  运输和保存
  可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:
  (1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;
  (2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
  (3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。
  细胞用途:仅供科研使用。
 
  HepG2人肝癌细胞/STR鉴定/赛百慷(iCell)接受后的处理:
  1)收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。
  2)请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
  3)弃去T25瓶中的培养基,添加6ml新的*培养基。
  4)如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代。
  5)接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。
 
  细胞培养步骤
  一、培养基及培养冻存条件准备:
  1、准备MEM培养基;北美胎牛血清,10%;双抗,1%。
  2、培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
  3、冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
 
  二、细胞处理:
  1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
  2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
 
  对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
  1、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
  2、加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
  3、按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
  4、收到细胞后*传代推荐将细胞悬液按1:2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中,建议冻存一支备用,后续传代根据实际情况按1:2到1:5的比例进行。
  细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。
 
  下面T25瓶为例;
  1、细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml*培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
  2、1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
  3、将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
 

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